FC Vysočina Jihlava – FK Viktoria Žižkov (14.05.2021, 17:00)
Rozhodčí: Miroslav Zelinka – Petr Kotalík, Michal Volf
Delegát utkání: Stanislav Volek
Delegát svazový: Jan Šotek
FK Fotbal Třinec – 1.SK Prostějov (15.05.2021, 17:00)
Rozhodčí: Jakub Vojkovský – Michal Novák, Lukáš Slavíček
Delegát utkání: Milan Ondo
Delegát svazový: Petr Hojsík
FK Blansko – FC Slavoj Vyšehrad (15.05.2021, 17:00)
Rozhodčí: Jana Adámková – Jakub Mojžíš, Lukáš Matoušek
Delegát utkání: Petr Mikel
Delegát svazový: Jaroslav Kubíček
FC Sellier & Bellot Vlašim – MFK Chrudim (16.05.2021, 14:00)
Rozhodčí: Lukáš Machač – Vít Melichar, Jan Váňa
Delegát utkání: Ludvík Urbanec
Delegát svazový: Ladislav Míka
FK Varnsdorf – FC Hradec Králové (16.05.2021, 17:00)
Rozhodčí: Alex Denev – Martin Leška, Jiří Pečenka
Delegát utkání: Jiří Neuberg
Delegát svazový: Libor Zeman
SK Líšeň 2019 – FK Ústí nad Labem (17.05.2021, 17:00)
Rozhodčí: Ondřej Cieslar – Adam Horák, Jan Dohnálek – Michal Křepský
Delegát utkání: Stanislav Kaláb
Delegát svazový: Michal Beneš
FK Dukla Praha – FC MAS Táborsko (17.05.2021, 17:00)
Rozhodčí: Karel Hrubeš – Simon Vejtasa, Jakub Bureš
Delegát utkání: Radim Adamec
Delegát svazový: Slavomír Kozel