FC Vysočina Jihlava – AC Sparta Praha B (22.10.2021, 16:30)
Rozhodčí: Pavel Franěk – Jakub Hrabovský, Michal Novák – Tomáš Švagr
Delegát utkání: Milan Ondo
Delegát svazový: Antonín Kordula
FK Fotbal Třinec – FC Zbrojovka Brno (23.10.2021, 10:15)
Rozhodčí: Tomáš Ulrich – Jakub Bureš, Alexandr Černoevič
Delegát utkání: Petr Vysloužil
Delegát svazový: Radek Kocián
FK Dukla Praha – FK Ústí nad Labem (23.10.2021, 10:15)
Rozhodčí: Marek Radina – Petr Kotalík, Lukáš Matoušek
Delegát utkání: Kamila Muziková
Delegát svazový: Petr Hojsík
MFK Chrudim – 1.FK Příbram (23.10.2021, 10:15)
Rozhodčí: Jana Adámková – Lukáš Lakomý, Jan Dohnálek
Delegát utkání: Ludvík Urbanec
Delegát svazový: Miroslav Zlámal
FC Sellier & Bellot Vlašim – MFK Vyškov (23.10.2021, 14:30)
Rozhodčí: Zbyněk Proske – Zdeněk Dobrovolný, Stanislav Pochylý
Delegát utkání: František Hubička
Delegát svazový: Dušan Pospíšil
Slezský FC Opava – FK Viktoria Žižkov (23.10.2021, 15:30)
Rozhodčí: Tomáš Klíma – Jakub Šimáček, Lukáš Slavíček
Delegát utkání: Ladislav Kruliš
Delegát svazový: Josef Bábíček
SK Líšeň 2019 – FK Varnsdorf (23.10.2021, 15:30)
Rozhodčí: Petr Dorušák – Michal Pfeifer, Jaroslav Poživil
Delegát utkání: Zdeněk Rumplík
Delegát svazový: Libor Zeman
FC MAS Táborsko – 1.SK Prostějov (24.10.2021, 15:30)
Rozhodčí: Josef Krejsa – Zdeněk Arnošt, Lukáš Machač
Delegát utkání: Martin Hrinko
Delegát svazový: Jaroslav Beneš